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细菌的鉴定之葡萄球菌属的鉴定方法

时间:2008-07-30 来源:爱猪网 作者:康大夫 编辑 点击:   网友评论  分享到微博
??葡萄球菌属(Staphylococcus)是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌,属微球菌科,广泛分布于自然界。包括金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)等32个种、15个亚种。临床上常以是否产生凝固酶将葡萄球菌分为凝固酶阳性和凝固酶阴性葡萄球菌两大类。
??凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要的致病菌,可引起社区和医院感染。感染常以急性、化脓性为特征,如果未经治疗或治疗不及时,感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官。金黄色葡萄球菌的致病性主要与各种侵袭性酶类(如血浆凝固酶、透明质酸酶、磷脂酶、触酶、耐热核酸酶)和多种毒素(溶血毒素、杀白细胞毒素等)有关,某些菌株产生的肠毒素可引起食物中毒,表现为急性胃肠炎。
??凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘摸正常菌群之一,也是医院感染的主要病原菌,其中,表皮葡萄球菌可引起人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎和人工关节感染等。
??近年来,从临床感染部位中分离的葡萄球菌多重耐药现象比较严重,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和表皮葡萄球菌(MRSE)的分离率逐年增高。特别是耐万古霉素金黄色葡萄球菌(MRVA)的出现,已成为临床抗感染治疗的棘手问题,实验室应重视和加强对耐甲氧西林葡萄球菌和对万古霉素耐药的葡萄球菌的监测。
??生物学特征
??典型的葡萄球菌呈球形,直径0.5—1.5μm,革兰阳性球菌,无鞭毛和芽孢,本菌属中大多数菌种为需氧或兼性厌氧菌,对营养要求不高,最适温度为35-37℃,最适pH为7.4-7.6。在普通琼脂平板上,经35-37℃培养24-48小时后,形成2-3mm呈黄色、白色、柠檬色等不透明圆形凸起菌落。所产色素为脂溶性色素。
??鉴定及鉴别要点
??1、 葡萄球菌属与微球菌属的鉴别:
??葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型,镜下以葡萄状排列为主,菌体较小;而微球菌属为氧化型或无反应,镜下以四联排列为主,并且菌体较大。
??2、 葡萄球菌属与链球菌属的鉴别:
?? 葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型,触酶试验阳性;链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型,触酶试验阴性。
??葡萄球菌属与微球菌科中其他菌属的鉴别见表
??
??表 葡萄球菌属与微球菌科其他菌属的鉴别
??菌属 触酶 四联状排列 葡萄糖发酵 动力 G+C mol%
??葡萄球菌属 + - + - 30-39
??微球菌属 + + - - 64-75
??动球菌属 + - - + 39-52
??口腔球菌属 d - + - 56-61
??肠球菌属 - - + d 37-45
?? 注:d 为反应不定。
??
??常见葡萄球菌的鉴别见表
??
??表 常见葡萄球菌的鉴别
??菌种 新生霉素耐药 多粘菌素B耐药 脲酶 木糖 蔗糖 甘露醇 血浆凝固酶
?? (5μg/片) (300U/片)
??金黄色葡萄球菌 - + + - + + +
??表皮葡萄球菌 - + + - + - -
??腐生葡萄球菌 + - + - + + -
??溶血葡萄球菌 - - - - + d -
??中间型葡萄球菌 - - + - + + +
??模仿葡萄球菌 - - + - + + -
??木糖葡萄球菌 + - + + + + -
??孔氏葡萄球菌 + - d - - + -
??华纳葡萄球菌 - - + - + d -
??人型葡萄球菌 - - + - + - -
??耳葡萄球菌 - - - - d - -
??松鼠葡萄球菌 + - - - + + -
??解糖葡萄球菌 - - - - - - -
?? 注:d 为反应不定。
??
??葡萄球菌属鉴定流程
??脓液、创面分泌物、穿刺液、咽拭子、尿液、痰液等 脑脊液、血液 粪便、呕吐物
??
??
??
??直接涂片 分离培养 增菌培养(5%二氧化碳)
??染色、镜检 接种血平板 接种葡萄糖肉汤或其
??(5%二氧化碳) 他商品化培养基
?? 分离培养 、
?? 初步报告结果 挑选可疑菌落 接种高盐甘
?? 露醇平板
?? 鉴定试验
??
??
??涂片 血浆凝固 耐热DNA 手工及仪
??染色 酶试验 酶试验 器鉴定和
??镜检 药敏试验
??
??报告结果

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