两例新生仔猪流行性腹泻的诊断分析与防控建议

　　5 讨论与小结

　　5.1 猪流行性腹泻

　　猪流行性腹泻是由冠状病毒（猪流行性腹泻病毒）感染所导致一种以水样腹泻、猪只逐渐消瘦为主要特征的病毒性疾病。可感染各生长阶段的猪只，在欧洲该病对断奶仔猪与生长育肥猪的影响较大，对哺乳仔猪的影响比较温和（即使没有PED母源抗体存在）[2]，但在亚洲该病对哺乳仔猪的影响非常大，死亡率可高达80％以上。好发于冬春寒冷季节，但2011年山东以南各省份全年均有急性病例，东北三省的发病率相对较低。主要临床症状为猪只食欲减退、呕吐、腹泻、脱水、甚至死亡。剖检主要病变为肠壁（特别是小肠壁）变薄甚至呈半透明状，胃内常充满未消化的凝乳块[2]。其临床症状、剖检变化与传染性胃肠炎非常相似。与之前的报道所不同的是：在这两个病例中均发现肾脏表面散布着大量的针尖状小出血点。但通过RT-PCR检测确定猪场A与猪场B的仔猪肠管样品中均呈流行性腹泻病毒阳性。此检测结果与Sun RQ等人[1] 在2010～2011年对我国9家规模化猪场病毒性腹泻的检测结果一致[1]，导致10日龄内哺乳仔猪的发病率与死亡率高达80％。据国际兽医局（OIE）调查，猪流行性腹泻与猪繁殖与呼吸系统综合征是近年来影响亚太地区养猪工业最重要的两种疾病[3]。

　　流行性腹泻病毒（PEDV）主要通过粪便进行传播，也可通过患病哺乳母猪的奶水进行传播[1]，通过粪－口途径进行感染。经检测，这两个发病猪场的患病仔猪粪便均呈PEDV阳性，但猪场A康复10～12日的1胎次后备母猪与经产母猪粪便样品均呈PEDV阴性，说明康复10日后，猪只不再向外界环境排毒。DaeSub Song等人[4]使用Vero细胞致弱的PEDV通过口服方式人工感染2周龄的哺乳仔猪与妊娠后期母猪，发现仔猪通过粪便最长病毒排毒时间为感染后的第9天，而母猪最长的向外排毒时间为感染后的第3天。两者的结论一致，但野毒对外排毒的持续期可能比致弱毒株要长些[5]。在本案例中，这些康复母猪所分娩的新生仔猪依旧发病了，可能原因如下：第一，因栋舍设计限制，本猪场在发病期间也无法做到全进全出，加之消毒措施不彻底，环境中存在的PED病毒会感染新生仔猪；第二，虽然康复母猪或经过返饲（猪场A）的母猪已产生了母源抗体，但哺乳母猪的奶水普遍不佳（图6），无法通过奶水中的母源抗体来保护新生仔猪。

　　5.2 猪流行性腹泻疫苗与免疫失败原因分析

　　开发高效的猪流行性腹泻疫苗是当前科学界面临的一个巨大挑战。在本次疫情中，虽然两猪场在妊娠母猪分娩前利用流行性腹泻－传染性胃肠炎二联灭活疫苗（疫苗毒株：CV777）进行跟胎免疫，但猪群发病快，仔猪死亡率高，说明当前所用疫苗的保护率不佳。主要的原因可能如下：1）疫苗毒株：流行性腹泻病毒变异较快，各国的疫苗毒株也有所不同，如日本：P-5V，韩国：KPEDV-9[6]。冠状病毒的纤突蛋白（S）基因变异性高且能够诱导产生中和抗体[ 7]。据Sun RQ等人[1]报道,2010～2011年所检测的仔猪流行性腹泻病毒S基因部分片段与疫苗株CV777之间的同源性为93.3%～94.7％，基因系统进化分析表明：新病毒株与以往的毒株及疫苗株均有所不同。2）疫苗类型：目前已商品化的疫苗包括灭活疫苗与活疫苗两类，我国以灭活疫苗为主，而韩国与日本以商品化的流行性腹泻活疫苗为主[8]。3）免疫途径：目前我国所使用的灭活疫苗采用后海穴注射免疫。但实验证明：利用Vero细胞致弱的流行性腹泻活疫苗通过不同免疫途径对怀孕后期母猪进行免疫,口服免疫组新生仔猪的死亡率(13%)明显低于肌肉注射组（60％），且口服免疫组仔猪体内的IgA抗体的浓度更高[9]。4）抗原含量：流行性腹泻病毒对培养条件要求苛刻，要达到有效的抗原滴度也存在一定的挑战。

　　5.3 流行性腹泻的复发与返饲技术应用

　　在本次疫病流行过程中，多家规模化猪场报告其猪场在一个月时间内连续两次爆发流行性腹泻。这可能因为在首次感染时，母猪群未被全部感染，存在一定比例的易感（空白）猪只，使得流行性腹泻病毒得以再次感染易感猪群。美国、加拿大等国家在蓝耳病爆发时，很多猪场管理人员为了缩短蓝耳病对猪群的感染期会使用已发病猪只的血清对全群猪进行同期感染。而在流行性腹泻与传染性胃肠炎的控制上，因商品化疫苗效果欠佳，返饲技术被广泛使用且取得了较好的效果，两者的免疫机理基本类似。所谓的返饲技术就是采用新发病哺乳仔猪的肠管、粪便等（发病24小时内采集病料最佳）病毒携带物通过口服方式感染母猪群，使其通过自然感染的途径产生免疫，新生仔猪通过母乳获得特异性母源抗体而获得保护。

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