猪传染性胃肠炎和流行性腹泻的鉴别

　　2.2PED流行病学

　　2．1．1流行特点:本病在12月至次年3～4月间多发，夏季也有猪感染发病，但相对较少。哺乳仔猪、断奶仔猪和育肥猪感染发病率可高达100，成年母猪发病率较低，为15～19。哺乳仔猪受害最严重，病死率平均50。本病通常在有一头猪发病后，同圈或毗邻猪相继于一周内发病，经过2～3周后流行终止.

　　2．1．2临床症状:潜伏期，新生仔猪为24～36h，育肥猪为2d以上。病猪表现呕吐、腹泻、脱水，开始时粪便黏稠，后变成水样便;精神沉郁，厌食，消瘦并衰竭。1周龄以内的哺乳仔猪常于腹泻后2～4d内死亡。断奶猪、育肥猪症状轻，发病4～7d后逐渐恢复正常。

　　病理剖检：剖检可见肠壁变薄，肠内有黄色粘稠液体，小肠粘膜绒毛大部分萎缩变短，上皮细胞坏死脱落。全身淋巴结肿大、出血，肾小管上皮细胞变性坏死。

　　诊断

　　目前，对这两种传染病的诊断方法主要有病毒中和试验，免疫荧光法，免疫电镜法，ELISA法RT-PCR法。随着分子生物学的不断发展，ELISA法和RT-PCR法以其敏感性高、特异性强越来越受到人们的重视。

　　3．1TGE诊断方法

　　3．1．1病毒的分离与鉴定原代和次代猪肾细胞、猪肾传代细胞系、猪唾液腺原代细胞、猪甲状腺原代细胞以及McClurkinST传代细胞已成功地用来从被感染猪的粪便及肠道内容物中分离TGEV。在ST或猪甲状腺细胞上的典型CPE由具有膨胀的、圆形或长形外观如气球的细胞组成。ST传代细胞已用于蚀斑或IF实验以检测TGEV野毒株，Kemeny(1978)。为提高病毒的分离率，在细胞培养液中加胰酶制剂或胰蛋白酶和使用较老的细胞可进一步提高ST细胞的敏感性，Bohl(1979)。Pocock和Garwes(1975)报道，在次代猪甲状腺细胞用弱酸性营养液时TGEV增殖滴度最高。

　　3．1．2电镜法检测通过电镜负染色法证实，在感染猪肠内容物和粪便中有TGEV。发病期间病毒存在于病猪的许多器官中，实验证实除脾脏外，其他器官均可检测到病毒，但是以空肠、十二指肠和肠系膜淋巴结中含毒量最高。通过电镜观察，病毒多分布在胞浆的空泡里和微绒毛间隙。在微绒毛间的病毒往往呈串球状排列。研究证实，免疫电镜(IEM)比常规EM技术更好，前者对检测临床样品或细胞培养物中的TGEV更敏感，并可提供病毒血清学鉴定。此外，用IEM更易区分TGEV和常见的膜类碎片，而且同时可检测其它肠道病毒的存在。经IEM观察，TGEV与PEDV之间未见到免疫交叉反应。

　　3．1．3免疫荧光法检测免疫荧光法(IF)和免疫过氧化物酶技术都可应用，但前者较常用。若IF或免疫过氧化物酶试验呈阳性，并伴有腹泻症状，则几乎肯定为TGEV。国外在小肠上皮细胞中检测TGE病毒抗原，采集病死猪小肠或腹泻早期将猪捕杀，取空肠和回肠粘膜涂片或将空肠和回肠制备冷冻切片进行直接或间接免疫荧光检测的方法已经建立，并得到广泛应用。但本方法必须在死后或扑杀后才能进行。我国哈尔滨兽医研究所研制成功了扁桃体采样器，采取猪只的扁桃体组织，做成冷冻切片，进行直接免疫荧光法检测TGE病毒抗原。本法是活体诊断，可以迅速做出判定，已广泛应用于疫病普查和口岸检疫。另外，一种用抗TGEV高糖蛋白N的单克隆抗体免疫过氧化物酶技术来检测TGEV(小肠组织)的方法已建立，且TGEV的单克隆抗体已被用IF或免疫过氧化物酶试验中。用上述两种实验方法已在呼吸道组织和鼻腔上皮细胞中检测出TGEV。用抗TGEV单克隆或多克隆抗体双层夹心ELISA方法已被广泛应用于检测在细胞培养、粪便和肠内容物中的TGEV，是一种快速且适用于从活猪中取得大量样品的诊断方法。

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