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实验室诊断聚合酶链式反应中应注意的主要问题: 一、试剂准备 1. DNA模版 2．对应目的基因的特异引物 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer ...; 作者：康大夫编辑发表于：2008-11-10 09:32:12　点击：175　评论：查阅全文...

实验室诊断聚合酶链式反应基本操作步骤: 〔PCR步骤〕标准的PCR过程分为三步： 1.DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 2.退火（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3.延伸（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳...; 作者：康大夫编辑发表于：2008-11-10 09:35:19　点击：427　评论：查阅全文...

实验室诊断正确区分病毒、原核生物、真核生物: 病毒（如噬菌体）是没有细胞结构，由蛋白质和核酸（每种病毒只含一种核酸，DNA或RNA）等物质组成的简单生命体。切不要把它们当成原核生物。病毒只能寄生在宿主细胞内才能正常地生活，根据寄主的不同，把病毒分为三类：①植...; 作者：康大夫编辑发表于：2009-02-05 09:34:46　点击：395　评论：查阅全文...

实验室诊断猪皮炎肾病综合征实验室诊断及控制: 摘　要：应用病理学和PCR方法，对浙江某猪场送检的疑似猪皮炎肾病综合征(PDNS)病猪进行诊断。结果发现肾脏呈现纤维蛋白性肾小球肾炎变化，真皮及皮下血管表现为坏死性脉管炎，淋巴组织中大量淋巴细胞缺失、多核巨细胞浸润，PCR扩增产物显示猪圆环病毒2型(PCV-2)阳性。结果表明，该猪场感染了PCV-2，并表现为PDNS的病理特征。关键词：猪皮炎肾病综合征；组织病理学；猪圆环病毒2型；聚合酶链反应控制猪皮炎肾病综合征(Procine dermatitis an...; 作者：齐新永等发表于：2009-02-14 10:30:34　点击：995　评论：查阅全文...

实验室诊断口蹄疫VPl基因的克隆表达及其间接ELISA方法: 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。口蹄疫在全球范围内传播甚广，欧、亚、非和南美的一些国家和地区都曾经成为口蹄疫的重灾区。该病传染性极强，危害...; 作者：蒲静等发表于：2009-02-27 09:37:17　点击：208　评论：查阅全文...

实验室诊断 ELISA方法的基本原理和操作步骤: 基本原理　　1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不...; 作者：康大夫编辑发表于：2009-03-18 10:17:44　点击：3780　评论：查阅全文...

实验室诊断猪的遗传育种中，分子育种距离生产有多远？: 作为当前炙手可热的研究课题，大有成为育种方法主流之势，分子育种距离生产有多远？　　分子育种(基因研究)是目前动物遗传育种的研究热点，并且大有成为育种方法主流的趋势，因为基因是可遗传的，只要找到决定动物某种性状的基因，就可以按照人类的需要选育品种，大大缩短育种年限，并且性状遗传稳定。目前分子生物学在养猪育种中的最突出的问题是什么？东北农业大学著名分子生物学专家李辉用精辟的一句话概括为：经济性状主效基因的筛...; 作者：康大夫编辑发表于：2009-03-18 10:20:45　点击：105　评论：查阅全文...

实验室诊断正确运用实验室诊断试验结果指导养猪生产: 　　在养猪生产中，由于疾病的复杂和混合感染的普遍，经常运用实验室诊断试验评估猪群的健康状况，监测猪群对免疫接种的血清学反应，监测疾病控制与净化程序的进展和成效。　　实验室的诊断试验结果在养猪生产中具有很重要的指导意义，但很多因素会对实验室诊...; 作者：发表于：2009-04-29 10:35:16　点击：411　评论：查阅全文...

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