7.2 疫苗
在实验室中，用PEDV、TGEV和RV的强毒通过肌肉、静脉、皮下、皮内、气管和腹腔等非口途径攻击敏感猪，经多天的临床观察，未见动物有腹泻和呕吐的临床症状，再采集小肠进行免疫荧光检查也未证实在小肠绒毛上皮细胞的胞浆中有病毒存在而用PEDV、TGEV和RV的强毒通过口服时都能使阴性猪发病产生典型的临床症状，用免疫荧光检查也能证实小肠绒毛上皮细胞的胞浆中有病毒存在。
这就从理论上启示我们，PED、TGE和猪轮状病毒病的最理想免疫途径应该是口服活毒，而这些活病毒应该是既不能引起猪发病，又要有一定的毒力，使病毒进入肠固有层以有足够的刺激产生IgG和IgA；如果毒力太弱病毒进入肠道不能增殖或有限增殖，对肠表层下IgA浆细胞的抗原刺激不足，相应地IgA产生极少。但研制这恰到好处的中毒有一定的难度，同时口服的免疫方法的可操作性也不强行报道曾试用低代次细胞培养TGE强毒诱导被动免疫，但结果表明口／鼻内感染的母猪血清学转化和仔猪的保护率不规律。如果母猪妊娠期间把TGE弱毒一次注射到肠腔。对其所产仔猪用强毒口服，结果保护性很差。然而在母猪妊娠期间连续肠内注射弱毒，其仔猪攻毒后有较好的保护力，这提示了口服免疫需要多次才行。有报道(美国《猪病学》第八版)，各种不同的TGE试验疫苗和两种商品疫苗给产前母猪注射，其结果是母猪所产仔猪的发病率和死亡率都有小幅度的下降，很不理想，原因可能是病毒通过注射进入体内后不能在体内，尤其在肠黏膜的靶细胞内复制繁殖.病毒很快被机体消灭，不能持续地刺激机体，抗体效价就不高。
鉴于PEDV、TGEV和RV以上的免疫特性，我们研制了“猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联灭活疫苗”。这三种病毒分别在三种敏感的细胞上繁殖，其病毒效价（TCID50）均大于1075每毫升。以兽用白油为佐剂W/O/W的双向苗。经交巢穴注射后，病毒抗原在体内缓慢释放，可持续地刺激机体产生抗体，由于该疫苗是水包油包水，相对单纯的油包水疫苗产生有效免疫的时间短些。实验室免疫试验表明，免疫母猪后其仔猪的被动保护率在95%以上，肉猪的主动免疫保护率在90%左右；大规模生产试用，免疫母猪后其仔猪的被动保护率在85%～95%，肉猪的主动免疫保护率在70%～90%。
7.3 三联灭活疫苗的免疫途径
肌肉注射 基于PED、TGE和猪轮状病毒病的免疫机理，肌肉注射有如下缺点。接种猪主要产生全身免疫，很少或不产生肠道免疫，当感染PEDV、TGEV和RV时保护率很低。如果是母猪，因乳汁内主要是IgG，而IgA的滴度很低，不能给乳猪提供理想的被动免疫所以哺乳仔猪的保护率也不高。
乳腺内注射 乳腺内注射可以在血清和乳汁中产生很好的IgG和IgA滴度，并且不注射疫苗的对侧和其他乳腺也同样产生抗体。所以，从理想的角度考虑，疫苗应该用乳腺途径注射，但是乳腺注射在操作上有一定的难度，极易发生乳腺炎。
交巢穴注射 在尾根与肛门间凹陷中的一个穴位，此处的淋巴分布密集。经实验室和多年的临床应用说明在母猪交巢穴注射后，乳汁内能产生较高的抗体。新生仔猪通过不断的吮吸母乳，乳中的抗体能很好地中和摄入的病毒.故新生仔猪有较好的被动保护率、所以推荐“猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联灭活疫苗”交巢穴注射。
肉猪的主动免疫 仔猪的交巢穴注射方法是将仔猪向下倒提，在尾根与肛门间凹陷中垂直或稍向上刺入。在肉猪后海穴注射疫苗后，也能产生较高的血清抗体效价，但由于血中的IgG不容易转运进入肠腔，肠黏膜的免疫作用不够坚强，因此有必要对肉猪免疫2次。
7.4 三联灭活疫苗的使用方法
母猪 在后备母猪阶段必须先免疫1次，在初产前1个月左右时再免疫1次。以后每胎免疫1次(即1年2次免疫)，免疫时间也是产前1个月。每次4毫升。
肉猪 由于各猪场的断奶时间不一，可以根据猪场断奶的时间安排在断奶前免疫1次，断奶后再免疫1次，2次免疫的时间相隔20天。初生仔猪每头0.5毫升.5～25千克仔猪每头1毫升，25千克以上猪每头2毫升。
其他 免疫期：接种本疫苗后10～15天开始产生免疫力，1个月时达高峰，至少可以维持6个月。贮藏：本疫苗在4"C～10℃暗处保存，有效期为1年。注意事项：①本疫苗避免日光直射。②当地应无疾病流行。体质瘦弱、患有其他疾病，特别患有蓝耳病和圆环病毒病时使用效果较差。③疫苗启封后1次用完。使用前应仔细检查.如发现有异物、变质等现象均不能使用。④注射器、针头等用具，用前需经煮沸消毒30分钟。注射部位用酒精消毒。⑤早期诊断，早期隔离发病猪，及时消除传染源，并定期进行带猪消毒和转群消毒。
责任编辑：陈静
