猪场人工授精操作要点及注意事项

七、猪场人工授精实验室工作程序：

1、程序一：

     打开电源(预热)—摇匀贮精—（检查贮精质量）—

　   配制稀释液和预热—采精前准备—采精—原精处理(活力、密度等)—稀释—包装—冷却—贮存

2、程序二：

     打开电源（预热）—摇匀贮精—（检查贮精质量）—配制稀释液和预热—采精前准备—采精—等量稀释—（等价）原精处理（活力、密度等）--再稀释—包装—冷却—贮存

八、打开实验室里需要预热的电器：

   1、空调（21—23℃）;

2、显微镜;

3、恒温载物台：并同时预热载玻片、盖玻片（37 ℃ ）(载玻片、盖玻片可在干燥恒温箱或自制预热箱中预热);

4、精子密度分光光度仪(精子密度光电比色计);

5、电子称(0.5g—2kg);

6、恒温磁力搅拌器;

7、恒温水浴锅(36℃):实际可操作在（37—38℃）或(38—39 ℃)(注意冬夏季节区别以及操作顺序不同而引起的差别);

8、干燥恒温箱(38—39℃)或自制预热箱（飞利浦保温灯）;

9、预热橱(内置一个干湿温度计)（也就是“传递窗”）（长宽高=30×40×40cm）（内悬挂100瓦灯泡或菲利谱乳猪保温灯皆可）。

九、摇匀恒温冰箱中储藏的精液：

1、  轻柔转动或摇动贮存在恒温冰箱中的精液瓶或精液袋，使之悬浮均匀（2次/天=早晚），防止营养物质发生沉淀，而影响精子的保存期;

2、        清点并记录贮存在恒温冰箱中的精液种类和数目;

3、        同时检查贮存精液的恒温冰箱是否处于17 ℃或18 ℃或17—18℃恒温状态下。

十、检查储存在恒温冰箱中的精液的质量：

1、将待检精液滴于预热过（37℃或37--38 ℃ ）的载玻片上，盖上预热过（37℃或37--38 ℃ ）的盖玻片，置于预热过（37℃或37--38 ℃ ）的载物台上，1—3min后即可观察;

2、        在400×显微镜下（目镜10 × ，物镜40 × ）（也可用100 × ）评估贮精质量，要求：活力≥60%;形态异常率≤15%(不能超过20%);死精率≤20%，并作记录;

3、         此步检查可省，可在贮存的精液使用时/前检查。

十一、配制稀释液的顺序：

1、        根据配种员自身经验、本周配种计划、昨天的配种情况、今天的推测、公猪使用记录等来决定稀释液的配制计划（估计蒸馏水或稀释液的用量）；

2、        根据个人操作习惯，有两种操作顺序可供选择：

         A：称量蒸馏水—预热（水浴锅） —稀释—搅拌（用手摇晃或用恒温磁力搅拌器）--预热（水浴锅）

         B：称量蒸馏水—稀释—搅拌（用手摇晃或用恒温磁力搅拌器）--预热

3、        使用恒温磁力搅拌器搅拌配制的稀释液时，把

转速调到5—7级搅拌10—15分钟即可。

  十二、配制稀释液时应注意的事项：

     1、稀释液应在配制好0.5—24h之间使用(30min前不可用,最好60min后使用,超过24h丢弃)；

2、配制好的稀释液未用完要存于2—8℃的冰箱中；

3、稀释剂要用干净的双蒸馏水稀释；

4、稀释液要完全淹没在恒温水浴锅内的水中，并盖住水浴锅盖子，水浴锅控制的温度应在36℃或37—38℃或38--39 ℃ （注意冬夏季节的差别以及操作顺序不同而引起的差别）；

5、双蒸馏水夏季可保存15天，冬天可保存30天，超期不要用；

6、制得的双蒸馏水盛放在干净的大玻璃水瓶或盛矿泉水的大塑料瓶内以作备用；

7、稀释剂与双蒸馏水配制比例是固定的，不可任意改变，若稀释剂较多，即稀释液浓度变大，那么稀释后的精液中的精子内外渗透压不等，会使精子向外渗水，导致活力降低甚至死亡；反之，向精子内渗水，同样精子活力降低甚至死亡。一般情况下，一袋稀释剂：蒸馏水==1：1（50g：1000ml）或一袋稀释剂：蒸馏水==1：1（25g：500ml），注意卡苏公司的稀释剂（47g/袋：1000ml水）；

8、为防止微生物污染或为了杀死精液中被污染的微生物，可在稀释液中加入抗菌素，如“双抗”（1000ml稀释液中可加入青霉素40万IU，链霉素20万IU）；

9、一旦稀释液中加入了抗菌素，此稀释液放置不要超过24h；

10、抗菌素水平下降很快，当天使用须重新加抗菌素（主要针对往日存放的稀释液）；

11、在稀释液中可以添加催产素，有助于提高母猪受胎率和产仔数（5IU催产素：1000ml稀释液）；

12、特殊情况下：新鲜精液现采现用(不能贮用)，可用(经过恒温水浴锅预热过的)等渗的GS液（5%）或等渗的GS（5%）盐（0.9%）水。

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