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通过检测淘汰野毒阳性公猪并强化疫苗免疫成功净化猪场伪狂犬病

作者:来源:时间:2008-04-21 10:45点击:

  本文刊登于《今日养猪业》杂志 2007年第3期
 
    摘  要:在750头基础母猪的规模化种猪场,由于引入未经检测的带毒公猪导致猪群感染伪狂犬病,通过对所有公猪和其他猪群抽样进行定期监测,及时果断清除带毒公猪,采用人工授精配种以及选用高质量gE基因缺失弱毒活苗强化母猪群和仔猪群伪狂犬病免疫,加强消毒隔离,提高生物安全措施,在近一年的时间内成功净化了伪狂犬病,明显提高了种猪的繁殖表现和生产成绩,伪狂犬病净化取得显著成效。由于伪狂犬病在中国呈流行性发生,为消除伪狂犬感染引起的繁殖障碍和呼吸系统疾病综合征,猪场有必要考虑控制并最终净化伪狂犬病。
关键词:伪狂犬病;净化;gE-ELISA;监测;基因缺失疫苗
 
    伪狂犬病(pseudorabies, PR)仍然是我国猪群的重要威胁性疾病。最近的流行病学调查结果[1]以及有关实验室对2006年全国9个省市规模化猪场的血清流行病学调查显示[2],大约有超过50%的规模化猪场为伪狂犬野毒(gE)阳性。小规模猪场和散养户感染情况可能要更严重一些。这种流行态势使得猪场很容易受到伪狂犬病的侵袭,给控制和净化带来很大困难。全球已经有很多国家清除了猪伪狂犬病,但目前中国尚无统一和强制性的区域及全国性净化计划,因此控制与净化取决于各个公司或各猪场自身的努力。毫无疑问,净化伪狂犬病将明显改善猪场种群的繁殖表现,降低猪呼吸系统疾病综合征(PRDC)的危害,显著提升猪场的生产效益和品牌效应。
    伪狂犬的控制与净化需要实施综合措施,包括采取严格的生物安全措施,依靠有技术实力的实验室对种猪群尤其是后备猪进行血清学监测,始终引入野毒阴性的后备公母猪,淘汰老龄的gE阳性母猪,选择优质高效的gE基因缺失疫苗,采用科学的免疫程序,定期进行血清学监测。在本研究中,我们对由于引入gE阳性公猪引起的伪狂犬病阳性猪场通过采取定期监测、淘汰阳性公猪以及改变免疫程序并使用高效力基因缺失弱毒活疫苗等综合措施,在规模化种猪场成功净化了伪狂犬病,现将结果报告如下:
 
1.猪场情况
    黑龙江省牧丹江一规模化种猪场,750头基础母猪。冬季35天断奶,夏季31天断奶,生产流程为:仔猪出生至53日龄在产房内,53日龄至93日龄在保育舍,93日龄分出后备母猪和后备公猪分别进入后备公猪舍和后备母猪舍、育肥仔猪进入育肥舍饲养至出栏。母猪到断奶后离开产房进入空怀舍。
2006年1月和5月对不同猪群(包括公猪、后备母猪、1-2胎、3-4胎、5-6胎、6胎以上母猪以及2w、4w、6w、8w、12w、20w、24w商品猪群)采样送海博莱实验室进行了血清学监测。伪狂犬病毒的检测采用gE-ELISA试剂盒(CIVTESTTMSUIS ADV gE,HIPRA)。结果显示所有样品都为gE抗体阴性,从而表明本场为野毒阴性场(见表3)。2006年10月之前猪场采用伪狂犬灭活疫苗并遵照如表1所示的免疫程序。
 
1.  200610月之前猪场伪狂犬病免疫程序
猪群
免疫方法
公猪
肌肉注射2头份灭活疫苗
母猪
每胎产前15-20天免疫1头份灭活疫苗
3-4日龄滴鼻半头份,4周龄肌肉注射1头份活疫苗
后备
选定后注射1头份灭活疫苗,2-3周后再注射1头份
 
2. 感染过程

1.  200610月各阶段猪群伪狂犬野毒感染情况,柱形显示不同猪群野毒感染阳性率
结果表明部分高胎次母猪和部分后备母猪感染。检测时间:

     2006年4月份猪场从外地引入14头种公猪,经过2个月的隔离期后进入繁殖群。从2006年6月份到8月份三个月的配种情况看,返情率明显升高,产房出现和以往明显不同的情况,猪场4胎次以上的母猪出现产死胎和部分死胎的比例升高,3胎次以内的母猪出现这种情况的很少,怀孕母猪群流产较少,一个月平均流产一窝左右。产房仔猪成活、保育仔猪成活和育肥成活都很高,根据高胎次母猪出现的这种情况,初步怀疑是伪狂犬病毒感染,而且判断可能是由于引进的种公猪带毒感染引起。因此2006年9月份猪场决定对所有公猪送海博莱实验室进行血清学监测,结果显示有5头公猪为gE阳性或可疑结果(见表3),证实为伪狂犬野毒感染。而检测结果也显示高胎次母猪感染伪狂犬野毒(图1)。因此猪场决定采取果断的措施实施伪狂犬净化。

3. 伪狂犬净化方案
3.1   对全群进行血清学监测以了解本场的感染状况和严重程序,结果见图1,表明部分高胎次母猪受到感染,而仔猪未受感染;
3.2   清除所有伪狂犬gE阳性和可疑的公猪,2006年猪场母猪更新率为35.8%,公猪更新率为169%,母猪为自繁自养,公猪一部分为自繁自养,一部分为外购,对于阳性的母猪根据繁殖情况进行淘汰;
3.3   对所有新购入公猪和补充的后备母猪采取严格的gE监测,选留阴性后备猪,阳性猪一律不得留作种用;
3.4   更换高效伪狂犬疫苗,加强伪狂犬病免疫,调整免疫程序,决定全群选用gE基因缺失弱毒活疫苗AUSKIPRA-GN,种猪首先间隔1个月做两次全群普免,随后遵照如下免疫程序。监督兽医注射疫苗的操作规范化,防止打飞针;
 
2. 猪场200611月之后伪狂犬病免疫程序
猪群
免疫程序
3-4日龄滴鼻1头份,6周龄肌肉注射1头份基因缺失弱毒活疫苗AUSKIPRA-GN
公猪
每年3次普免1头份活疫苗
母猪
每年3次普免1头份活疫苗
后备
选定后注射1头份活疫苗
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3.5   加强产房的消毒工作,每天消毒一次,连续操作两个月,以后每两天消毒一次。消毒药物准备三种不同成分的消毒剂,穿插使用。保育和育肥舍,2-3天消毒一次,也是三种消毒剂穿插使用。对场区过道进行消毒,用3%的火碱喷洒,上冻之前在场区道路上铺白灰后,在上面喷洒3%的火碱,使地面形成封闭。对进出的人员和车辆进行严格消毒。
3.6   加强灭鼠工作,不定期投放灭鼠药物;
3.7   建设人工授精采精室和配种间,减少公猪疾病的传播,场子内实行本交和人工授精两种方法进行配种。
 
4. 各阶段检测结果
 
4.1 自2006年初起,本场定期对猪群进行血清学监测,实验室监测结果总结如表3所示,结果显示在2006年5月前整个猪场为伪狂犬阴性,但是由于2006年引入阳性公猪导致猪群发生伪狂犬感染,2007年4月除一头外引进公猪为阳性外,所有猪群均为阴性(见图2),2007年5月对全群公猪进行gE进行监测,全部为阴性(见图3),表明已成功净化伪狂犬病。
 
3.  猪场不同时期猪群伪狂犬野毒抗体(gE)监测结果
检测日期
检测方式
样品数
检测结果(阳性率)
公猪
母猪
商品猪
2006.01
全群抽样
67
0
0
0
2006.05
全群抽样
60
0
0
0
2006.10
全群抽样
78
0
23%
2.78%
2006.11
所有公猪
32
9.4%
-
-
2007.04
全群抽样
78
8.3%
0
0
2007.05
所有公猪
29
0
-
-

 
220074猪场各组猪群伪狂犬野毒血清学监测资料,柱形显示为单个动物gE抗体滴度,临界值为45,结果显示所有猪群都为野毒感染阴性。
 

3 20075猪场所有公猪群伪狂犬野毒血清学监测资料,柱形显示为单个动物gE抗体滴度,临界值为45,结果显示所有29头公猪都为野毒感染抗体阴性。

5. 生产成绩

    随着伪狂犬病毒的感染,猪场出现严重的繁殖障碍,出现返情和死胎的比例在2006年11月达到高峰,窝产活仔数也处于最低值。而随着伪狂犬净化项目的实施,猪场的生产成绩也显著得到改改善。自2007年3月起,受胎率和分娩率也得到显著提升(见表4和图5),猪场繁殖障碍的比例一直低于10%,窝产活仔数也稳定在9.8头以上(见表4和图6),
4.  猪场不同猪群生产成绩(2006.9-2007.4)
分娩时间
生产指标
2006.9
2006.10
2006.11
2006.12
2007.1
2007.2
2007.3
2007.4
窝产活仔()
9.76
9.5
8.9
9.89
9.59
9.64
9.89
9.82
繁殖障碍比例(%)
15.6
21.4
25
18.1
10.5
10.4
7.3
8.5
产房成活(%)
97.5
97
95.4
95.8
98
95
99
98
保育舍成活(%)
96.7
96.1
95
95
94.3
86.9
97
98.5
育肥舍成活(%)
96.6
97
98.5
98.7
97.1
97.8
98.9
97

 

 

 

 

5. 猪场不同阶段种猪受胎率与分娩率(2006.9-2007.4)

6. 猪场不同阶段窝产活仔数与繁殖障碍比例(2006.9-2007.4)

6. 总结与讨论

    由于伪狂犬病在中国呈流行性发生[3,4],因此控制伪狂犬病必须采取综合措施。本猪场由于引入阳性公猪导致伪狂犬病在猪群发生,导致母猪返情率上升,母猪群繁殖障碍比例大幅升高,给猪场带来严重的经济损失,另一个不可忽视的影响是伪狂犬病感染是猪呼吸系统疾病综合征的重要原因。本猪场通过野毒抗体监测、淘汰阳性公猪、选用高质量基因缺失弱毒疫苗、改善免疫程序等一系列措施,成功实施了伪狂犬净化,显著提升了猪场的生产成绩和效益。这也充分说明,引种是控制伪狂犬病的重要环节,无论是伪狂犬病阳性还是阴性猪场,引入后备猪必须经过实验室检测,确保gE为阴性再进入生产群。另外也充分表明,只要猪场管理者有决心并持之以恒,在现有条件下净化伪狂犬病是完全能够做到的。
     公猪的伪狂犬感染往往是猪场容易忽视的环节,精液传播是一种可能性[5],另一种可能性是病毒血症期间通过呼吸道传播,而在猪场公猪往往由于免疫注射操作的原因导致免疫不确实,所以猪场应加强公猪的免疫操作。
     伪狂犬疫苗,尤其是基因缺失弱毒活疫苗在防制伪狂犬病中起了非常重要的作用。即使是伪狂犬病阴性场,也要采用高质量的基因缺失疫苗对猪群进行强化免疫。免疫猪被伪狂犬病毒感染后,通常野毒不能透过胎盘感染胎儿,仅限于上呼吸道定植。免疫猪野毒排毒量显著减少,排毒量减少1000倍以上,并且排毒时间大幅缩短约4-7倍。值得注意的是,某些伪狂犬疫苗毒株能够阻止伪狂犬病毒的潜伏感染,特别是包含TK基因的伪狂犬弱毒疫苗,能够在潜伏感染部位三叉神经节定植,从而起到占位效应[6],这对于伪狂犬的净化来说至关重要,因为净化伪狂犬病的一个重要目标是减少和清除猪群中潜伏感染动物。而灭活疫苗由于不能在靶组织定植,因此不能阻止或降低潜伏感染。在伪狂犬流行地区,由于感染压力较大,应用活疫苗可以提供更充分的保护力。所以在各种基因缺失疫苗中,gE基因缺失疫苗毒株是全球应用最广泛的疫苗毒株,并且与之配套的检测试剂盒gE-ELISA也是全球商业化程度最高、应用最成功的鉴别诊断试剂盒[7],因此在很多国家和地区,强制性要求使用gE基因缺失弱毒疫苗。
    在本场的伪狂犬净化中,我们对原有免疫程序进行了修改,种猪实施强化免疫,采用基因缺失弱毒疫苗ASKIPRA-GN对种猪首先实施一次普免,并在一个月后又再免疫一次,随后采用一年普免三次的策略,这将在种猪群建立高效而整齐的免疫力,极大降低种群的感染压力,减少病毒排毒量和排毒时间,结合淘汰阳性种猪的策略,因而在半年多的时间内净化了伪狂犬病。而对于仔猪来说,伪狂犬疫苗的免疫在目前中国伪狂犬病毒呈流行性的情况下也是非常必要的。仔猪可在2-3周龄滴鼻免疫1头份,而为了保证在育肥阶段有足够的保护力,有必要在9-10周龄对仔猪再进行第2次肌肉注射免疫。而对于伪狂犬病阴性场,可以采取监测gB抗体的方法来评价疫苗免疫效果。
    对猪群进行定期血清学监测在如今的规模化、现代化养猪体系中的作用已经越来越重要,血清学监测资料已经成为猪场安全生产体系中不可或缺的组成部分。血清学监测将提供猪群流行病学的动态的数字化信息,为生产者控制疫病、制定免疫程序以及评价免疫效果提供科学的依据。
 
参考文献:
[1] Wang K., Yang H., Zhang L. and He W. Studies of Pseudorabies sero prevalence in China swine farms[C]. 3rd APVS Congress, Wuhan, China, 2007.
 
[2] 周绪斌,Daniel Torrents Gil, 李 聪 等,加强免疫与监测,净化猪场伪狂犬感染-2006年我国9省市规模化猪场伪狂犬病野毒流行病学调查与分析[C]. 中国猪业发展大会会刊,中国北京,2007,6.23-24.
 
[3] 崔尚金,卫秀余,宋长绪. 当前猪伪狂犬病国内流行情况[J].猪业在线,2005,4:14-15.
 
[4] 白挨泉,王晓清,甄劲松,等. 广东部分集约化猪场猪伪狂犬病毒野毒感染的血清学调查[J]. 中国畜牧兽医,2005,32(3):55-57.
 
[5] Medveczky, I., and Szab., I.  Isolation of AujeszkyÕs disease virus from boar semen[J]. Acta Vet Acad Sci Hung  1981,29:29-35.
 
[6] Schang, L. M.; Kutish, G. F.; and Osorio, F. A. Correlation between precolonization of trigeminal ganglia by attenuated strains of pseudorabies virus and resistance to wild-type virus latency[J]. J Virol 1994, 68:8470-8476.
 
[7] White, A. K.; Ciacci-Zanella, J.; Galeota, J.; Ele, S.; and Osorio,F. A. Comparison of the abilities of serologic tests to detect pseudorabies-infected pigs during the latent phase of infection[J]. Am J Vet Res 1996, 57:608-611.
 
 
 

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