兽医必备技能：猪病料采集方法及注意事项

　　

　　为了使广大养殖朋友更好的对猪场进行疾病控制，我们制定一份病料采集方法注意事项，供广大养殖朋友参考。

　　采集病料前需要进行器械的灭菌消毒，使用一次性针头和注射器及真空采血管；采取一种病料，使用一套器械与容器；做好计划，如要采集足够的数量及采集的部位、种类等；还要准备采集后的用具等消毒、清洗液及容器等用品。

　　一、血样采集

　　具体步骤如下：

　　1 准备好灭菌（至少是干净的，但必须保证干燥）干燥的带盖子的塑料试管或者青霉素瓶若干；准备好专业的采血针，或者一次性注射器（5-10毫升）。保证每个血样一个瓶子或一个针筒。

　　2 采血。采血前，在相应的注射器或容器上做好标记。

　　（1）耳静脉采血。本法为最常用的取血法之一（适用于中、大猪）。将猪保定后，或由助手以手扶住头部及耳部。选耳静脉清晰的耳朵，用75%酒精局部消毒，待干。用手指轻轻摩擦猪耳，使静脉扩张，用连有针头的注射器在耳缘静脉末端刺破血管,等血液漏出取血或将针头逆血流方向刺入耳缘静脉取血，取血完毕用棉球压迫止血。黑色皮肤猪耳静脉看不清，用手电筒在耳、腹面照射利于采血。

　　（2）前腔静脉采血（适用于仔猪，小猪）：猪前腔静脉，在第一对肋骨间的胸腔入口处的气管腹侧面，由左右两侧颈静脉和腋静脉汇合形成。该血管在一周龄猪直径约5毫米，成年猪约1厘米以上。采血部位在第一对肋骨与胸骨柄结合处直前，但由于左侧靠近隔神经，以右侧采血为宜。

　　（3） 注意事项：

　　选用合适的注射器及针头

　　公母猪宜选用16号 50mm针头；30kg以上的中大猪，宜选用12号38mm针头；10-30kg小猪，可选用9号 25mm(一次性注射器常配的针头)；10kg以下仔猪，应选择9号 20mm针头(一次性注射器所配的另一种规格的针头)。

　　选准进针的部位

　　一般来说，30千克以下的小猪应采两前肢与气管交汇处，种公母猪和30千克以上的中大猪可选颈部最低凹处。进针时又要掌握好一定的方向、角度和深度，要及时调整。血管被刺穿，会引起血肿，要立即停止采血，须换另一头猪采血。特别要注意的是对仔猪采血时，不能太猛、太深，以免伤及心包或心脏。

　　特别指出，血液和血清是不同的概念！血清是血液的组成部分，它必须从血液中分离出来后，才能用于血清学试验，但是这种分离过程需要专业人员来操作。因此，采集的血样，最好在凝固后，直接送到检测单位，以保证血清学试验的正确进行。一般采血2～5毫升就足以满足实验室诊断的用量了。重点提示，用于血清学试验的血样，不能加任何抗凝血剂！

　　3 血液保存：将采完血样的注射器活塞，微微拔出一些，使针筒内留有部分空气，然后盖好针头盖子，将注射器针头向上成30度角，斜放，等待血液完全凝固（大约10～30分钟），此过程中不能移动注射器，防止溶血。用真空采血器采集的血样，直接倾斜放置好。夏天在常温下放置一段时间，冬天要放置在25～37℃温水中一段时间，以利于血液中血清的析出。血样送检时，在保温箱加适量的冰块防止血液变质，送检过程中尽量防止剧烈振荡。

　　注意事项：（1）擦拭采血部位的酒精未干，不要立即采血。血液混进酒精后易 造成溶血（使检测结果不准）；

　　（2）血液在运输过程中，防止坐摩托车、拖拉机等剧烈展荡，使血细胞破裂引起溶血（要注意血液防震）

　　（3）血液存放的容器要洗净，确保干燥。

　　二、组织样采集：

　　疑似猪瘟的病料采集：

　　1 放血。先把猪放血处死，在从大腿内侧将皮肤、肌肉切开。

　　2 解剖摘取扁桃体。从胸部中线偏右处，切断肋骨，打开胸腔，在气管与肺脏连接处向前5～10厘米位置，割断气管，并顺着气管向前割开，直至咽喉部，从后向前将气管割断一半，这时就可以在舌跟靠近上腭的左右两边看到两个淋巴结，即扁桃体。小心取下扁桃体放置于干净的保鲜袋中，并做标记。

　　3 解剖摘取肺门淋巴结。一只手握住气管切断处，使劲向外拉出肺脏，另一只手帮忙扯断肺脏与身体的连接，并将整个肺脏翻转过来，使背面向上，此时可在气管分为支气管，与肺脏连接处，找到分别位于左右两侧的两个肺门淋巴结，小心摘取，放置于另一个干净的保鲜袋中，并做标记。

　　4 肺脏样品的采集。如有必要，此时可将割取部分肺脏样品，一般只要割取介于病变和正常组织之间的部分，放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记，当然也可以将整个肺脏保存。

　　5 解剖摘取腹股沟淋巴结。将两个后腿，向下向外压，就可以在两侧凹陷的腹股沟处中间部位，看到微微或明显隆起，即腹股沟淋巴结，小心割开皮肤和淋巴结表面的被膜，小心摘取，放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记。

　　6 解剖摘取脾脏。沿腹中线将腹部皮肤、肌肉和腹膜，小心切开并打开腹腔，在腹腔的左侧位于胃和回肠下面，找到脾脏，小心摘取，放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记。

　　7 解剖摘取肠系膜淋巴结。从腹腔的右侧位于肝脏和胃下面，找到肠系膜，在肠系膜靠近肠道的末端，可以看到很多结节，即肠系膜淋巴结，小心摘取，放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记。

　　8 流产胎儿。通常木乃伊胎不能作为检测样品。对于新鲜流产的胎儿，可作为检测样品。对于流产日龄较早的胎儿，可取整个胎儿保存；如果是晚期流产的胎儿，最好根据上述步骤，摘取相应组织，保存送检。胎儿的保存方法同上。

　　疑似蓝耳病病例的病料采集：

　　具体病料采集程序与猪瘟病料的采集基本一致（包括步骤1、3至6、8），需要强调的是，在蓝耳病的检测中，必须包括淋巴结和肺脏样本！如果是检测流产胎儿，那么，最好能剪取部分胎衣液或剪取胎衣样本，保存方法同上。

　　疑似圆环病毒感染病例的病料采集：

　　对于疑似圆环病毒感染的病例，病料采集包括步骤1、3至7。记住，在圆环病毒的检测中，必须包括淋巴结样品。

　　疑似伪狂犬病病例的病料采集：

　　伪狂犬病病毒可危害呼吸系统、繁殖系统或中枢神经系统，因此，病料采集包括步骤1至8。同时，最好能够采集神经系统的样品。具体步骤为用手手术刀片将猪的头皮剥去，露出头盖骨，然后用凿子（也可可用一字螺丝刀），轻轻凿开头盖骨，并清理骨头碎片，等整个大脑露出后，小心用手摘取，放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记。特别提示，因为现在用的伪狂犬病疫苗绝大多数都是基因缺失疫苗，因此还需进行血清学抗体的检测。

　　疑似乙型脑炎病例的病料采集：

　　病料采集包括步骤1、5、8。注意，乙型脑炎病毒可感染人类，特别是儿童，导致严重的脑炎，因此取病料时，请务必带上乳胶手套，并小心操作。

　　疑似传染性胃肠炎和流行性腹泻病例的病料采集：

　　本病的病料采集，包括步骤1、5、7。同时需要采集肠道样品。从腹腔中剪取病变的小肠10～15厘米，从一侧将肠道剪开，轻轻刮去肠道内容物，然后放置于一个干净的保鲜袋中，并做标记。

　　疑似流感病例的病料采集：

　　按照上述方法采集肺脏和淋巴结即可。

　　检测病料的运输注意事项：

　　死亡的猪应尽快采集，夏天不应超过2小时，冬天不超过6小时（还要视具体温度）。采集猪的病料必须新鲜，尽可能减少污染。用于检验的内脏组织块不必太大。无论是运送新鲜的病料还是冰冻的病料，保证整个过程中，病料始终处于低温状态，十分重要。一个简单的方法是，用废弃的矿泉水瓶，灌水后，放置在冰箱中，制备冰块，在病料运输时，将足量的冰块和病料一起放置在泡沫箱中，用冰块包裹所有病料，如果冰块不够多，最好将冰块放置在病料的上面和下面。密封后，快速运送到检测单位。送检过程中要防止倾倒、破碎、避免样品泄漏，要注意有的样品不能剧烈展荡，要注意缓冲放置，所有样品都要贴上能标示采样猪的详细标签。

　　注意事项：1 病料要新鲜 必须是选取新鲜及有病变部位的材料

　　2 取材要有代表性 对每一器官，应在各个不同部位多取几块组织，并且病变部分应尽量附带一些周围的健康组织。

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