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临床快速药敏实验在疫病防控中应用

作者:佚名来源:兽研检测时间:2015-07-09 09:27点击:

  随着畜牧产业的不断发展,各种细菌性疾病给养殖业造成经济损失的问题日显突出,阻碍了养殖业的快速发展。使用抗生素防治细菌性疾病成为经常性工作,但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗生素,造成细菌产生耐药性问题正变得越来越突出,不少菌株可耐受多种抗生素。因此而造成的危害十分严重,它不仅使抗菌药的疗效降低,疗程延长,还使死亡率升高和治疗费用增加,给养殖业带来巨大经济损失。耐药菌株还可能将耐药性基因由动物转移给人类,对人类健康造成潜在威胁。因此,畜牧生产中应合理使用抗生素,来避免或减少耐药性的产生。

  一.如何快速选择病原菌敏感的药物

  1.1实践证明,快速药敏实验可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性,指导临床合理用药、灵活选药。可以在本地区容易买到的药品中选出最敏感的药物,既能缩短病程,又能避免盲目用药,减少费用。

  1.2因为快速药敏实验在体外进行,操作相对简单,成本相对较低,既经济又快速有效,可以对流行病学调查进行监控,控制和预防耐药菌株的流行。

  二.快速药敏实验意义

  在疫病的诊断和防治中,应在细菌分离鉴定的同时,先进行药敏试验,及时指导养殖户进行有效防治。这种快速药敏试验方法在操作的规范性、结果的准确性等方面虽存在一定差异,但能及早为防治提供依据,控制疫病,减少死亡,为控制疫病赢得时间。在生产中具有非常重要现实意义。

  三.快速药敏实验操作步骤

  3.1琼脂平板制备

  按照营养琼脂干粉说明来进行稀释,稀释后琼脂放在微波炉里进行加热,加热后琼脂移至超净工作台中,静置待温度降至50℃(手指能接受的最高温度)左右时,开始倒平板,内径225px平皿每个平皿倒入约10ml琼脂液,倒入后迅速混匀铺满平皿底部。

  3.2药液及药敏纸片制备

  3.2.1药液制备:按药品使用说明书上的配料或饮水浓度配置按1g需加多少毫升水或配多少毫克饲料,就相当于配制药液所加蒸馏水的毫升数。如10g药物可配50kg饲料,其换算方法为:1g本品加5000ml蒸馏水。此溶液液即为用于做药敏试验的药液。

  3.2.2药敏纸片制备:要用质量较好的定性滤纸,用普通的打孔器打成直径6mm的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的小瓶或小平皿中,以单层牛皮纸扎口或包扎。经15磅15-20分钟高压灭菌后,置于37℃温箱或烘箱中一天,使完全干燥。按每张纸片饱和吸水量为0.01ml计,在上述含有50片纸片的小瓶内加入药液0.5ml,不时翻动,使滤纸片将药液均匀吸净,一般浸泡30分钟即可。同时在记录药物名称,于37℃温箱过夜。在温箱或烘箱中的时间不宜过长,以免某些抗生素失效。青霉素、金霉素宜在低温下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮,置阴暗干燥处或家用冰箱中保存,有效期4-6个月。

  3.3病料接种

  取新鲜病料组织于超净工作台中或酒精灯旁,剪取新鲜组织断面无菌涂抹到营养琼脂板上,涂布整个琼脂平板表面,反复涂布几次,保证涂布均匀。

  3.4贴药敏纸片

  用无菌镊子将纸片放于固体培养基表面并轻压,使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果,要求药敏纸片均匀分布于培养基上,位置安排适中,防止出现抑制圈重叠。一般各纸片中心相距应大于24mm,可在平皿中央贴一片,外周等距离贴7-9片。记住每种药敏纸片的名称。

  3.5温箱培养

  贴完药敏纸片的平皿倒放在37℃恒温箱中培养24小时以上。

  四.药敏实验结果观察


  五.药敏实验选药原则

  5.1在选择高敏药物时还应考虑药物的吸收途径。因为药敏试验是药液直接和细菌接触,而在给畜禽用药时,必须通过机体的吸收才能使药物发挥疗效,所以在给畜禽用药时,高敏药物一定要配合适宜的给药方法,并予以足够剂量、足够疗程,才会取得好的治疗效果。

  5.2药敏试验结果仅为临床选择高敏药物的参考。因动物机体及环境等因素影响,药物的药敏试验与临床治疗效果的符合率一般为70-80%,所以也不能过分地依赖药敏试验。如发现疗效不显著应及时换药。

  5.3药敏试验确定的首选药物不是一成不变。随着药物使用频率的增加及新特药的不断出现,细菌对原先的高敏感药物可能不再敏感。因此,定期进行药敏试验了解本场细菌对抗菌药的敏感性情况是很有必要的。

  5.4窄谱抗生素能解决的问题不选广谱抗生素,一种抗生素可达到治疗作用时,不要用两种药物联合应用。必须应用两种抗生素时,应选择联合应用具有协同作用的药物。

  5.5避开已经使用过的药物或其同类药物,发病期间已用过的药物或同类药物一般不用。

  六. 临床案例

  河南省开封市经销商送检奶样进行药敏实验。


  药敏试验结果





  结论分析

  依据药敏试验纸片法结果分析:该样品对1234、1196、9404奶样效果显著,对8178、1612效果不显著。

  奶样4222、2354、9523、6558和8026细菌培养没有菌落,疑似奶牛临床用药抑制细菌生长。

责任编辑:宋美丽  

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