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规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定

作者:康大夫来源:互联网时间:2013-10-23 09:11点击:

  
核心提示:以下文章给养猪介绍,在规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定。

  仔猪黄白痢又称新生仔猪腹泻,是仔猪黄痢和白痢的总称,很大一部分是由致病性大肠杆菌引起的一种高致病性的传染病,以排出白色或黄色稀粪和迅速死亡为特征。由于大肠杆菌血清型众多,且不同年龄的猪感染大肠埃希菌的主要血清型不同,因而疫苗的使用保护性差,且由于耐药性的产生,都给本病的防治造成一定的难度。本试验对某猪场发生仔猪黄白痢的病原菌进行分离鉴定,旨在为该养猪场制定有效的防制措施提供依据。

  1材料与方法

  1.1病料与试剂

  来源于镇江地区某规模化猪场11窝30日龄内发生黄白痢的仔猪,用灭菌棉拭子从腹泻仔猪直肠采集粪便55份,进行细菌的分离鉴定。

  营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂、SS培养基、三糖铁培养基;生化鉴定培养基购自杭州天和微生物试剂公司;药敏纸片购自杭州天和微生物试剂公司;大肠杆菌O抗原定型血清购自中国兽医药品卫生监察所。

  1.2试验动物

  体重20-25 g健康小白鼠90只,雌雄各半,由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。

  1.3细菌分离

  猪e网网友建议用棉拭子采集发生黄白痢的仔猪的肛门粪便,混悬于装有灭菌生理盐水的灭菌离心管中,摇动离心管彻底洗涤拭子粪便于管中,并靠壁旋动拭子,挤出液体。用接种环取上述大便悬液1—3环,接种于麦康凯琼脂培养基平板,置37℃培养24 h后观察培养特性。将以上麦康凯培养基中的红色菌落,再接种于SS培养基、麦康凯培养基中,置37℃培养24 h后进行纯化培养,观察菌落的生长情况,并取麦康凯培养基上的单个菌落进行涂片,革兰氏染色、镜检。

  1.4生化特性试验

  按文献方法进行。取纯培养细菌接种于营养肉汤中,37℃培养24 h后,接种到各微量发酵管及种生化培养基中,置37℃培养24 h后,观察记录结果。

  1.5致病性试验

  将接种细菌后的营养肉汤37℃培养24 h后,分别腹腔接种体重20 g左右的小白鼠,每株接种10只,每只0.2 mL(含菌量约为8.0×108CFU/mL),同时用10只小白鼠接种无菌肉汤作对照。饲养观察、记录死亡数,并从死亡小白鼠的心血中分离细菌。

  1.6血清型鉴定

  经分离及初步鉴定的细菌送扬州大学进行血清型鉴定。

  1.7药敏试验

  按K—B法,选取上述致病性的大肠杆菌菌株做药敏试验。置37℃培养24 h后观察,根据抑菌圈直径大小来判定其对药物的耐受性。

  

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