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兽用B超在克隆猪研究中妊娠诊断的应用

作者:王少华 杨文科 叶锋 杭孝 潘登科来源:中国畜牧兽医2007 年第 34 卷时间:2008-09-30 00:02点击:

中国首例体细胞克隆猪是中国农业大学于2005 年取得成功的(潘登科等 ,2006) 。克隆胚胎的移植是在河北三河明慧养猪场进行的 ,移植后采用兽用B 超诊断仪进行妊娠诊断 ,并且进行了连续的跟踪妊娠诊断观察 ,产仔结果与B 超诊断结果基本一致。本研究较详尽地阐述了兽用 B 超在克隆猪研究中妊娠诊断的临床应用情况。

1   材料与方法

1. 1   试验动物  河北明慧养猪集团生产场自然发情的二元(长大、 大长) 经产母猪为克隆胚的代孕母体。

1. 2   器材   50S Tringa VET便携式兽用B 超诊断仪 ,荷兰 PIE MEDICAL 公司。

1. 3   移植的胚胎  移植胚胎为猪2~4细胞期克隆胚胎(图1 ,实验室构建克隆胚过程在这里不做介绍) 。

 

1. 4   克隆胚胎移植的时间和方法  

 2005 年 4 月 11日~4 月 14 日 ,共移植受体母猪 3 头。受体母猪为发情 1 d的经产母猪。手术部位为一侧腹壁 ,采取一侧输卵管移植。B792 号受体母猪移植克隆胚150 枚 ,B790 号受体母猪移植克隆胚 20 枚并且本交 ,P1652 号受体母猪移植克隆胚 60 枚。

1. 5   妊娠检测方法

  B2型超声波图像仪通过腹壁成像 ,可在胚胎移植后 25 d开始妊娠诊断。当探测无反射(液体)和强反射(致密组织)的部位时 ,分别显示无回声波的黑色和强回声波的白色 ,显示的是被查部位的一个切面断层图像。猪的探测部位可选择在最后一对乳头的腹部两侧 , 用手指状突阵探测头 5. 0MHz进行扫查诊断(图 2) 。

 


1. 6  妊娠诊断的时间  本研究于胚胎移植后 30、52 和 90 d进行了连续的跟踪妊娠诊断观察。详细情况及图片资料如下。

2   结果

克隆胚胎移植给 3 头经产母猪后 ,超声波妊娠检测结果见表 1。

 

   超声波妊娠诊断广泛应用于克隆猪的研究中 ,在国外报道较多 (Walker 等 , 2002 ; Boquest 等 ,2002 ;Lee 等 ,2003) ,但国内尚未见报道。本研究使用 50 S Tringa VET 便携式兽用B超诊断仪对克隆胚代孕母猪妊娠进行监测 ,胚胎移植后 30 d妊娠率为66. 7 %(2/ 3) 。从后期结果来看 ,30 d 确诊阳性准确率为 100 %。50 d后可准确检测到胎儿的数量及胎儿头部和脊柱。90 d 可检测到胎动 ,代孕母猪B792 检测到 3 个胎儿 ,实时超声扫描可见 1 头胎心搏动 ,发现有的胎儿无胎动 ,有个别胎儿外型轮廓看不清。产仔结果:3 头黑色克隆香猪 ,其中 1 头健康存活 ,1 头死胎 ,1 头畸形。产后的胎儿死胎与畸形和B 超的诊断结果是一致的。而代孕母猪B790 移植同时本交,子宫角扩张明显,胎动明显,产仔结果为5头白色仔猪,毛色表明非克隆香猪,说明超声波检测到的是正常受精卵体内发育的状况,发育正常。

   
   
   
   


3   讨论

本研究使用兽用 B 超对克隆胚代孕母猪的妊娠进行诊断监测 ,与实际产仔情况一致 ,这说明 ,在克隆猪的课题研究中兽用 B 超对于移植后的受体母猪妊娠监测是非常有意义的。兽用 B 超能够及时地诊断出母猪子宫的妊娠变化 ,包括胎动、 胎儿数目、 胎心跳和胎儿发育状况 ,从而对胎儿进行全过程的监测和跟踪。

在克隆胚着床后全程监测的过程中发现 ,怀孕子宫的扩张情况并不大 ,比正常配种怀孕的子宫扩张要小得多 ,临床实时超声扫描中发现有的胎儿无胎动 ,有个别胎儿外型轮廓看不清。表明克隆胚的体内发育较正常受精卵要差 ,个别胎儿发育异常。这些现象我们就不难理解造成克隆动物妊娠率低、流产率高、 出生死亡率高的原因了。

因实时超声是动态的表现结果 ,而得到的图象是单幅的静态的 ,所以 ,胎动及胎心跳在这次克隆移植中没有记录 ,这给临床上动态监测记录提供了更高的要求。

代孕母猪胚胎移植后,宜尽早作出妊娠诊断,确定妊娠与否,及时采取措施,这对于保胎是十分必要的。而B超检测具有诊断时间早、 准确率高等优点,对于移植后的受体母猪妊娠监测是非常有帮助的。

目前 ,兽用B 超在兽医临床上的应用已经越来越广泛(冯现明 ,2005) 。随着我国养猪业的发展,B超诊断仪价格的降低、 体积变小 ,如 50S TringaVET便携式兽用B 超诊断仪的重量仅有 800 g ,可以放在前臂上使用 ,并可使用充电电池连续使用4 h ,可做到随时随地成像 ,它必将在生产中得到越来越广泛的应用。

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