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猪圆环病毒 (PCV2)综述

作者:来源:时间:2008-05-30 18:08点击:

PCV2、 M.hyo和SIV分别占42%、22%、22%和19%。这些病例存在延长的临床情况特别严重的细支气管炎和细支气管纤维变性,在病损中存在大量PCV2抗原,由此推断为PCV-2相关的PRDC。
在美国发生PRRSV/PCV2/M.hyo共同感染引起的慢性呼吸道病的育肥猪场,病死率达到10-20%范围并不少见。同样,在急性SIV感染期同时感染PCV2时,病死率可能达10%,即使应用攻击性的治疗方案,这种方案过去用于防止SIV暴发的病死率是高度有效的。由PCV2和M.hyo共同感染(没有PRRSV和SIV)引起的地方流行性呼吸道病也常见,增加了解决麻烦的难度。虽然尚不清楚PCV2所起的作用是否为主要病原体、协同病原体、继发或机会性病原体,独特的肺损害伴随着PCV2抗原的论证当然可以推断PCV2在美国的PRDC中起着重要作用。相反,PRDC在西部加拿大并不重要,很可能因为该地区许多养猪单位没有M.hyo,以及在很多情况下PRRSV毒株的致病力较低。

文献记载,伴有PCV2的特征性肺病损有实验证据。在早期的PMWS病例报道中具有细支气管炎的间质性肺炎。Magar等(2000)用SPF猪接种PCV2,产生了除PMWS的特征性淋巴组织病损外,还有支气管间质性肺炎。Harms等(2001)用悉生猪接种PCV2,产生了温和的呼吸道病和支气管间质性肺炎的显微损害。Bolin等到(2001)用不吮初乳猪接种PCV2诱发了温和的呼吸道病和多灶性间质性肺炎。Rovira等(2002)用寻常猪接种PCV2诱发了温和的间质性肺炎和淋巴浆细胞性鼻炎。此外,用SEW猪接种PCV2的传染性克隆,可以产生温和的肉芽肿性支气管间隙质性肺炎。

PCV2与其他呼吸道病原体之间的相互作用或协同作用可能是最为重要的事物。用PRRSV和PCV2作实验性共同感染,在实验猪的肺内发现的PCV2核酸或抗原量比单独PCV2感染要多。用PRRSV/PCV2共同感染的实地病例的肺作免疫组织化学检验时一致显现PCV2抗原,证实了PRRSV诱发PCV2增殖增加的实验观察。从诊断证据连同上述描述的模型,有力地证实PCV2在PRDC中的重要作用和加剧了PRRSV-PCV2共同感染的病症。总的来讲,PRDC严重病例的诊断性研究应该包括PCV2的检验,并采取步骤尽量减少PCV2感染的效应。

5.PCV2相关性肠炎

从有腹泻病史的猪群,表达或不表达衰竭病症,在送交的病例中确定存在PCV2相关性肠炎的现象日益常见。有关兽医送交病例的目的是想实验室肯定由胞内劳森氏菌(Lintracellularis)引起的增生性回肠炎。虽然临床症状和增厚的回肠粘膜的肉眼病损与回肠没有差别,但显微镜检查肯定了存在肉芽肿肠炎和集合淋巴结淋巴细胞缺失。此外,免疫组化染色显示病理损害中有大量PCV2抗原,与PCV2相关性肠炎的确诊是一致的。值得注意的是对上世纪80年代中期的肉芽肿性肠炎病例作回顾性检验,证实了病损与PCV2感染有关。应该考虑PCV2相关的肉芽肿性肠炎与生长一育肥猪的非应答性腹泻有差异。

6.PCV2相关性中枢神经系统病(CNS)

最早kanitz(1972)把先天性颤抖与一种病毒感染联系起来,Hines和Lukert(1994)首次报道PCV和先天性颤抖之间有潜在联系。这项工作在日期上早于PMWS的发现和PCV2的鉴定,近年的资料进一步证实了这些早期的报道。Stevenson等(2001)近来证实在先天性颤抖猪的脑和脊髓中存在PCV2的核酸和抗原。在实验接种的不吮初乳猪的脑组织中PCV2DNA也存在最多。共同作者之一-Halbur常观察到在美国的PMWS病猪中呈典型病毒性脑炎的非化脓性脑膜脑炎,免疫组化染色有助于在脑炎病损中显示PCV2抗原。证据在继续积累和证实PCV2相关的CNS疾病。

二、发病机制与防制对策

现有研究证明PCV2与相关疾病的发生机制与免疫系统的损害有关:而对此猪病的防制对策又是综合性的。现将有关情况综述如下:

(一)、免疫刺激、免疫抑制与发病机制的关系

Joaguin等认为z:PCV2的感染,对免疫系统的效应来讲似乎是一把双刃剑。实验证明:一方面PCV2和PRRSV或PPV共同感染,表明这些病毒能刺激和激活免疫系统,从而在共同感染猪内,增进了PCV2增殖。另一方面,严重的淋巴组织病损,包括淋巴细胞缺失和这些组织中免疫细胞亚群的其他变化,是严重发病猪的规律性特征。因此推断PMWS感染猪对其他免疫原不能增进有效的免疫应答,成为本病致病机制的重要原因。上述现象可称之为同一硬币的两面。

1.免疫系统细胞中PCV2的增殖

PMWS病猪的特征性损害为恒定地包含不同程度的淋巴细胞缺失和淋巴器官的肉芽肿炎症,而PCV2核酸和抗原主要从PMWS病猪组织的细胞浆中检出,极少在巨噬细胞、树突状细胞和多核状细胞的细胞核内检出。病毒可从全身巨噬细胞,包括肝(kupffer细胞)、肺的肺泡和间质细胞及其他任何器官系统的炎症浸润液中的巨噬细胞中检出。在严重的PMWS病猪中能观察到显著的淋巴细胞缺失,但在淋巴细胞中不能检出PCV2的核酸和抗原,或者极少发现。实验证明:病理损害的严重程度、淋巴组织中病毒存在量和临床后果之间具有强力的正相关。

众所周知,DNA病毒是在细胞核内增殖的,然而奇怪的是归属DNA病毒的PCV2在单核细胞/巨噬细胞内罕有发现,却在细胞浆内存在大量抗原和核酸。已经知道血细胞和其他上皮细胞或内皮细胞的细胞核内存在病毒标记物,由此推断这类细胞在病毒增殖中起着关键作用,而且单核细胞/巨噬细胞浆内存在的抗原和核酸是其吞噬结果所致。骨髓中巨噬细胞/单核细胞系统细胞前身在病毒增殖中的作用应该探索。

2.免疫刺激和PCV2

现在已有许多实验证明:幼龄易感猪接种PCV2,不作额外操作,可产生典型的PMWS显微病损,但只产生温和的临床病症。而PCV2与PRRSV或PPV共同感染的猪可产生严重的病症,由此推断巨噬细胞受到PRRSV或PPV有关的激活,促进了PCV2的增殖。或者其他未知因素可能增强了两种共同感染病毒的增殖。PRRSV在全世界广泛分布。在PMWS感染猪中,PCV2和PRRSV共同感染的比例很高,在美国高达20-60%。德国学者V.E.Ohlinger等对432个PMWS样品的检查结果表明PCV2与PRRS共同感染率高达75.9%。

如果PRRS和PPV刺激免疫系统和促进PCV2增殖因果关系成立的话,可以假设在强力的佐剂中加入不相干的非传染性免疫原作局部或全身性免疫刺激也应诱发PMWS。这一假设在对3日龄悉生猪的试验中得到了证实:单独感染PCV2的猪没有一头发展成PMWS,而使用不完全Freund佐剂加钥孔血蓝素作肌肉注射,另外用(或不用)硫羟乙酸盐(葡聚糖)作腹腔注射,所有免疫猪都出现了严重的PMWS,然而另外二次分别用3周龄和9周龄的寻常猪作类似的试验,试验猪和对照猪均未出现PMWS。

上述研究结果表明:在某些条件下,免疫刺激可能在形成PMWS中起着重要作用。那么在实地情况中是否可得到验证,迄今己有两个研究似己得到证实。第一个实验希腊学者在一次PMWS暴发的商品猪场中,取84头猪分成3组,每组28头。第一组在7日和28日龄接种猪霉形体疫苗,在42日龄注射PBS。第2组在7日龄注射PBS,在28和42日龄注射非特异性免疫调节剂。第3组在7、28和42日龄注射PBS作对照。试验结果第1组42.9%的猪发展成PMWS。第2组50%的猪发展成PMWS。第3组对照猪只有10.7%发展成PMWS。第二个实验是在一个因PMWS遭受25%以上损失的猪场中进行的。实验观察期4个月,其中半数仔猪分别在1和4周龄时接种霉形体疫苗,而在不接种霉形体疫苗的5个组中有4个组因死亡和PMWS相关疾病的损失有所减少。上述二个现场实地试验结果也支持免疫系统的非特异剌激在某些PCV2感染猪中能触发PMWS。然而应用疫苗和免疫刺激剂触发PMWS达到什么程度,尚待更多的实验和实例阐明。

3.免疫抑制和PCV2

由于免疫抑制而导致免疫缺陷的临床表现一般可见:对低致病性或减弱疫苗的微生物可以引发疾病:重复发病对治疗无应答性:对疫苗接种没有充分免疫应答:在一窝猪中有一头以上发生无法解释的出生期发病和死亡:猪群中同时有多种疾病综合征发生。而这些特征在PMWS的猪群中基本上都有不同程度的发生。

根据病理学、免疫组织学和血流细胞计数(flow cytometric)研究认为,PMWS病猪确实存在免疫抑制。这些研究结果表明:淋巴细胞缺失和淋巴组织的巨噬细胞浸润,是PMWS病猪的独特性病理损害和基本特征。而且此特征与血液循环中B和T细胞减少和淋巴器官中这类细胞的减少呈高度相关:与周围血液和淋巴组织中巨噬细胞/单核细胞谱系细胞的增加呈高度相关。另外己证实的淋巴组织、相关免疫细胞和血液中的细胞有可能存在大量的PVC2抗原。上述变更的细胞群体参与了血液和组织两者的免疫系统,由此推断活动性的病猪至少短暂性地不能发动有效的免疫应答。

PMWS病猪可发生短暂性的淋巴细胞减少,但深度的持续的淋巴细胞减少,不是PMWS的规律性特征。

上述研究应视为“正在进展的工作”。因为数据的解译可能将被修正。但无疑PCV2与猪免疫系统的相互作用对相关的研究人员、临床兽医、制药业者和养猪业者提出了多方位的独特的挑战。

(二)、防制对策

现有的研究己较充分地说明,PCV2与其相关猪病的发生还需要另外的条件或共同因素才得以诱发临床病症。尽管有实验证明,用PCV2蛋白接种猪的尝试,其初步结果很受鼓舞,但实地应用这种疫苗还有一段距离。世界各国目前控制本病的经验和笔者的实践似乎证明,对共同感染原作适当的主动免疫和被动免疫有明显的效果。选择性的预防性投药和治疗,对控制细菌源性的混合感染或继发感染,同样是可取的。但是至今PCV2引起相关猪病的病原和机制尚且未完全了解,因此还不能完全依赖特异性防制措施,只有同时开展有效的综合性措施,才能收到事半功倍的效果。

1.己知共同感染原的免疫

(1)PRRSV弱毒疫苗接种

现在的实验已充分证明:一些特定的PRRS弱毒疫苗,对各类接种猪群是安全的,即使怀孕后接种,有可能垂直感染胎猪,但亦不表现对其胚胎期的继续生长和分娩后的健康损害。笔者曾对二个大型PRRS和PCV2共同感染的发病猪场(年出栏3-6万头,病死率35-40%)实施PRRS弱毒苗的免疫,病死率下降80%左右。诚然目前PRRS弱毒疫苗的远期生物安全评估,不同学派之间还有一些争议,但是实际应用效果是明显的,美国和欧洲都有注册的PRRS商品弱毒疫苗的生产和供应。目前无论国际和国内,采用PRRS弱毒疫苗免疫的猪场,不论其覆盖面还是应用数量,都在猛增。

(2)PPV疫苗的接种

PPV作为PCV2的共同感染原己得到实验确认,但在实地这类疾病一般都是呈散发性的,其原因是绝大部分经产母猪抗体持有率,无论是接种疫苗或自然感染都在95%以上,而仔猪获得的母源抗体,其抗感染的有效持续时间可达100天左右。而未经PCV免疫的初产母猪则可能有较高的发病率。仔猪和育肥猪的发病是否归属PPV为共同感染原,采用病猪二份血清(间隔3-4周)或PCR检测肺中的PPV得到实证,这种针对性免疫,己证实在儿群猪中收到了实质性的效果。

(3)其他可能共同感染原的免疫接种

不同猪场的疾病谱常常是不完全相同的,发病猪场首先要确定自身的可能共同感染原,确保妊娠期胎儿和吮乳期仔猪的安全是首先要解决的关键。因此根据不同的可能病原和不同的疫苗对母猪实施合理的免疫程序至关重要。母源抗体消失后的仔猪和育成猪的共同感染病原的确定,有赖于双份血清抗体或病原检测结果,采用合适的疫苗和药物防治,才能收到应有的效果。

由于因免疫猪霉形体疫苗诱导发生PMWS的几起报道,应当引起重视,但亦不能人云亦云,各个猪场要根据自己的实践加以判断,笔者以为,如果这类高效佐剂疫苗能刺激PCV2增殖成为普遍现象的话,可能在四周龄时进行免疫有关。因为这一时期及以后,正值PCV2母源抗体消失后进入一个新的感染期有关,当然尚需实验加以证实。

(4)人工被动免疫

各国曾经应用血清疗法,结果不一,但常常获得成功。其大体方法是,从猪场的育肥猪采集血清(笔者以为健康的淘汰种猪血更好)。分离血清,注射给断乳期的仔猪,一般采用腹腔注射。为了安全起见,必须考虑供血者的选择、血清处理、血清贮存、注射方法等,必须坚持当地法规,竭力推荐实行此法的猪均只能用该场的供血猪。

(5)“感染”物质的主动免疫

“感染”物质,通常指本猪场感染猪的粪便、死产胎猪、木乃伊等,喂饲母猪,尤是初产母猪在配种前喂料,能得到较好效果。如有一定抗体的母猪在怀80天以后再作补充喂饲,则可产生高水平免疫,并通过初乳传递给仔猪。这种方法,不仅对防制本病,保护胎猪和吮乳猪的健康有效,而且对其他肠道病毒引起的繁殖障碍也有较好的效果。

2.20点综合防制计划

分娩期:

(l)仔猪全进全出,二批猪之间要清扫消毒。

(2)分娩前要清洗母猪和治疗寄生虫。

(3)限制交叉哺乳,如果确实需要也应限止在分娩后24小时之内。

断乳期(保育期):

(4)猪圈小,原则上一窝一圈,猪圈分隔坚固(壁式分隔)。

(5)坚持严格的全进全出。(进猪时间同一猪舍内的进猪先后严格控制在一周之内),并有与邻舍分割的独立的粪尿排出系统。

(6)降低养猪密度:0.33m2/猪

(7)增加喂料器空间:>7cm/仔猪

(8)改善空气品质CNH3<10ppm,CO2<0.1%,相对湿度<85%。

(9)猪舍温度控制和调整。3周龄仔猪:28℃,每隔一周调低2℃,直至常温。

(10)批与批之间不混群。

生长/育肥期:

(11)猪圈小,壁式分隔。

(12)坚持严格的全进全出,坚持空栏、清洗和消毒制度。

(13)从断奶后猪圈移出的猪不混群。

(14)各育肥圈猪不再混群。

(15)降低饲养密>0.75m2/猪。

(16)改善空气质量和温度。

其他:

(17)适应的疫苗接种计划。

(18)保育舍内要有独立的饮水加药设施。

(19)严格的保健措施(断尾、断齿、注射时的严格消毒)。

(20)将病猪及早移往治疗室或扑灭。

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