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连载(8)《最新人工授精技术规范》-张汀

作者:来源:时间:2008-06-10 15:02点击:

第八节 猪的人工授精实验室精液处理规范
目标:保证精液在不受不良物理、化学、生物因素影响的情况下,进行精液的处理和保存。
用品清单:采精用品、精液品质检查用品、精液稀释液配制与精液稀释分装用品、保存用品、输精用品、消毒用品(详细说明见用品清单)
采精室送来的精液应在最短的时间内进行稀释和保存,但在稀释前应对精液进行一些检查,以确定精液是否有使用价值;
1.直观指标测定
  容量  新鲜精液容量应在100-250ml;过多,可能是混有尿液或副性腺有炎症,过少,说明采精方法不当或公猪生精能力降低。
  色泽  精液色泽应为乳白色或灰白色,红色说明有血液。绿色说明有脓液,清黄色说明有尿液;精液色泽越白越浓(可能偏黄)说明精子浓度越高。
  气味   精液应没有明显异味,有腥味说明有脓液,有臊味说明混有尿液;
2.活力测定   将精液轻轻摇动或用洁净的玻璃棒搅动,用微量移液器或玻璃棒取精液20uI,放于预温后载玻片中央,盖上盖坡片,在载物台上预温片刻,用推进器将载玻片推至物镜下,在100和400倍下进行观察。如果精子无凝集、出现大群运动波,无明显死亡精子。应为“很好”(5分);如果精液出现大群波动,但有少量死亡精子应为“好”(4分);如果有成群运动,但有精子凝集现象,应为“一般”(3分);有大片凝集或死亡,但有部分精子在正常运动应为“差”(2分)。一般新鲜精液和保存精液应在3分以上方可用于输精。没有载物台恒温设备的实验室,可将预温至37ºC的厚玻璃板和载玻片叠在一起,取20uI精液放于载玻片上,盖上盖玻片,迅速放在100倍镜头下检查活力。
在进行精子活力或密度测定时,应注意(1)显微镜的光源光圈应尽量小些,光线过强,就无法看清精子;(2)每次调节显微镜焦距时,都应先将载物台先调到与物镜最近的距离,但不能使载玻片与物镜接触,然后缓慢放低载物台,同时从目镜观察,直到观察到精子为止;观察活力时应轻轻调节微调,以观察各个层次的精子活动情况。
3.密度测定    一般猪场不进行密度测定,可能通过精液的外观检查如色泽判断精子密度,呈乳白色说明精子密度大,白度越高说明浓度越高,相反则说明精子密度低。如果有能力,可用计数板数测定密度,如果有专用的比色仪进行密度测定更方便。也可将精液样品送至科研单位,让技术人员进行密度测定,并将此数值作为稀释倍数的参考。正常的全份精液的密度在1.5-3亿 / 毫升。浓份精液密度在3-6亿/毫升。
4.畸形率测定  初配公猪在使用前及正常使用的种公猪应每季度进行一次畸形率测定,精子可用伊红、龙胆紫或纯兰、红墨水等染色剂染色,并在显微镜400倍下观察,畸形率不应高于25%。如果带中段原生质的精子增多,说明采精频率过高,如果断尾精子增多说明公猪受过高温影响或发烧过;其它畸形精多,可能公猪有先天性损征应予以淘汰。也可将精液样品送至科研单位进行评定。
5.精液的稀释  经过品质检查合格的精液应立即进行稀释,稀释时应将精液与稀释液放在同一个水浴锅中片刻等温后,将稀释液缓慢倒入精液中,并轻轻搅动或摇动。最好稀释时,精液仍放在原来的集精袋中。一般可根据需要和计算(估算)的稀释倍数和精液量加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:2,最大稀释倍数不超过1:9。如果 是收集的是全份精液(不包括最初射出的精液),稀释倍数为1:2.5,稀释后每个剂量应为70毫升,每个剂量含20毫升鲜精,这样可保证每个剂量中30-60亿个精子。同样,如果是浓份精液(约为全份精液的一半),可按1:6稀释,每个剂量70毫升,含鲜精10毫升。
6.精液的分装  将稀释后的精液放在台架上,分装管的玻璃管一端插入精液中,打开开关,用一支5ml一次性注射器套上移液管的吸咀与另一端连接,拉动注射器活塞,使精液充满分装管,关闭分装管开关,取下注射器吸咀,将分装管端插入精液袋的灌装口 ,并将精液袋挂在固定的板面上,使其自然悬垂。打开开关,使精液进入精液袋内,侍精液灌装到规定刻度时,或用电子秤称量到一定重量(如70克或80克)时关闭开关,将管插入另一悬挂的精液袋内,然后打开开关。取下灌装好的精液袋,放在热封口机上封口。封口后的精液可暂放在一个泡沫塑料盒中,等全部灌装完后,将精液袋在泡沫塑料盒中停留片刻,再放入17ºC恒温冰箱中保存。
7.精液的保存  应确保冰箱功能正常和通电正常,每12或24小时将精液袋取出,上下翻转数次,使沉淀的精子与稀释液混合一下,有利于延长时间。如果停电时间不超过4小时,应在停电期间尽量减少开冰箱的次数。如果停电时间过长,冬季可在冰箱中放置30ºC左右的水袋,夏季可在冰箱下层放置一些冰袋,并将其用毛巾包,以维持合适的温度。
8.精液的运输   袋装精液可放在泡沫塑料箱中运输,输精时,也应将精液放在泡沫塑料箱中运至待配母猪舍内。

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作者简介:
    大学毕业后一直从事养猪工作,在一线作过饲养员、技术员、技术场长、场长、总经理等职。现担任北京挑战牧业科技有限公司技术顾问,河南省原阳太平种猪场等多家万头种猪场技术及管理顾问。主攻:种猪育种,猪病防治,猪场设计,猪场管理方向;作者联系:E-mail: zht780202@126.com

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